[Ludger] Monosaccharide release & labelling kit

[Ludger 한국공식대리점]

[Ludger] Monosaccharide release & labelling kit

Description:

치료용 당단백질(glycoprotein therapeutics) 및 사전 방출된 글리칸(pre-released glycans)으로부터 중성 및 아미노 단당류(neutral and amino monosaccharides)를 방출 및 라벨링하기 위해 사용됩니다. 본 키트는 정량 분석 또는 루틴 단당류 분석을 위해 활용될 수 있습니다. 96개 샘플 분석이 가능한 충분한 용량을 제공합니다.

LudgerTag Monosaccharide Analysis Kit는 당단백질 바이오의약품 및 표준물질에 존재하는 단당류를 방출하고 형광 표지(fluorescent labelling)하기 위한 시약들을 포함하고 있습니다.

Specifications:

Monosaccharide analysis는 ICH Q6B 가이드라인에 따라 바이오의약품(biopharmaceuticals)의 특성 규명(characterisation)을 위한 규제 요구사항입니다. 해당 분석 정보는 의약품 개발 전 과정에서 활용될 수 있으며, 당화(glycosylation)의 유형(N-linked 및/또는 O-linked)과 당화 정도를 확인하는 데 사용됩니다. 또한 제조 공정 중 QC lot release 단계에서 배치 간 일관성을 입증하는 데에도 활용됩니다.

LudgerTag Monosaccharide Analysis Kit 1개에는 최대 96개 분석 샘플을 처리할 수 있는 시약이 포함되어 있으며, 두 세트의 reagent로 구성되어 각 세트당 48개 샘플을 분석할 수 있습니다. 일반적으로 샘플당 약 50 µg의 glycoprotein이 분석됩니다.

분석 방법:

• 약산 가수분해(mild acid hydrolysis)를 통해 glycoprotein으로부터 단당류를 방출
• 방출된 단당류를 2-aminobenzoic acid (2AA)로 형광 표지(fluorescent labelling)
• HPLC 또는 UHPLC를 이용한 2AA-표지 단당류의 상대 정량 분석(relative quantitative analysis)

LudgerTag MonoMix monosaccharide standard:

• 글루코사민(glucosamine), 갈락토사민(galactosamine), 갈락토스(galactose), 만노스(mannose), 푸코스(fucose)로 구성된 표준물질
• 자일로스(xylose) 표준물질 (100 nmol)
• 정확한 정량 분석을 위한 internal standard로 사용
• 가수분해 시약 (Hydrolysis Acids)
• 2M Trifluoroacetic acid (2M TFA)
• 6M Hydrochloric acid (6M HCl)

2M TFA는 중성 단당류(neutral monosaccharides) 방출에 적합하지만, N-acetylglucosamine (GlcNAc) 및 N-acetylgalactosamine (GalNAc)에는 효율이 낮아, 해당 경우 6M HCl 사용이 권장됩니다. 일반적으로 동일 샘플의 별도 반복 실험으로 각각의 산을 사용합니다.

HPLC / UHPLC 분석:
HPLC: LudgerSep R2 column (Cat No. LS-R2-4.6×150): 주요 7종 monosaccharide 분리에 적합
UHPLC: LudgerSep uR2 column (Cat No. LS-UR2-2.1×50): 샘플당 약 8분의 고속 분리 가능

Solvents:
Solvent A (BPT solvent): 정제수 기반 용액: 0.2% butylamine (2 mL/L), 0.5% phosphoric acid (5 mL/L), 1% tetrahydrofuran (10 mL/L)
Solvent B: 50% acetonitrile : 50% Solvent A

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